Diagnosis akromegali cukup mudah (tetapi hanya jika Anda memikirkannya), karena melibatkan tes darah untuk menentukan tingkat GH dan IGF-1. Pada akromegali, terdapat tingkat IGF-1 dan GH yang tinggi, mengetahui bahwa sekresi GH biasanya intermiten, tetapi pada akromegali selalu tinggi karena tidak lagi diatur. Diagnosis laboratorium definitif didasarkan pada tes glukosa. Karena glukosa biasanya menurunkan sekresi GH, pemberian glukosa oral memungkinkan untuk mendeteksi, dengan tes darah berturut-turut, bahwa, pada akromegali, sekresi hormon pertumbuhan tetap tinggi.

Setelah hipersekresi GH dikonfirmasi, maka perlu untuk menemukan asalnya. Saat ini, standar emas adalah MRI otak yang mungkin menunjukkan tumor kelenjar pituitari. Dalam kasus yang sangat jarang, itu adalah tumor yang terletak di tempat lain (paling sering di otak, paru-paru atau pankreas) yang mengeluarkan hormon lain yang bekerja pada kelenjar pituitari, GHRH, yang merangsang produksi GH. Pengkajian yang lebih ekstensif kemudian dilakukan untuk mengetahui asal mula sekresi abnormal ini.