Tes ELISA: apa prinsipnya?

Tes ELISA: apa prinsipnya?

Definisi: apa itu tes ELISA?

Teknik uji imunoabsorbsi enzim terkait – dalam bahasa Inggris Enzyme-Linked Immuno Assay – atau uji ELISA adalah uji imunologis yang memungkinkan pendeteksian atau pengujian molekul dalam sampel biologis. Itu dikonseptualisasikan dan dikembangkan oleh dua ilmuwan Swedia, Peter Perlmann dan Eva Engvall di Universitas Stockholm pada tahun 1971.

Molekul yang diuji dengan metode ELISA umumnya adalah protein. Dan jenis sampel termasuk bahan biologis cair - plasma, serum, urin, keringat -, media kultur sel, atau protein rekombinan - protein yang diproduksi oleh sel yang materi genetiknya telah diubah oleh rekombinasi genetik - dimurnikan menjadi larutan.

Tes ELISA terutama digunakan dalam imunologi untuk mendeteksi dan / atau mengukur keberadaan protein, antibodi atau antigen dalam sampel. Tes serologis ini mendeteksi secara khusus antibodi yang diproduksi oleh tubuh sebagai respons terhadap kontaminasi virus.

Prinsip tes ELISA untuk penyakit menular

Penggunaan antibodi untuk diagnosis penyakit menular merupakan metode yang spesifik dan cepat. Teknik ELISA adalah teknik imuno-enzimatik yang memungkinkan untuk memvisualisasikan, dari sampel biologis, reaksi antara antigen – tubuh yang dianggap asing oleh organisme hidup – dan antibodi menggunakan reaksi warna yang dihasilkan oleh penanda enzim – umumnya alkaline phosphatase dan peroxidase – sebelumnya melekat pada antibodi. Reaksi warna mengkonfirmasi identifikasi bakteri yang diisolasi atau keberadaan virus yang diinginkan dan intensitas warna memberikan indikasi jumlah antigen atau antibodi dalam sampel yang diberikan.

Berbagai jenis tes ELISA

Ada empat jenis utama tes ELISA:

  • ELISA langsung, memungkinkan untuk mendeteksi atau mengukur antibodi. Ini hanya menggunakan antibodi primer;
  • ELISA tidak langsung, yang paling banyak digunakan, juga memungkinkan untuk mendeteksi atau menguji antibodi. Ia menggunakan antibodi sekunder yang memberikan sensitivitas lebih baik daripada ELISA langsung;
  • ELISA dalam kompetisi, memungkinkan dosis antigen. Diproduksi oleh kompetisi untuk obligasi, tidak menggunakan enzim;
  • ELISA «dalam sandwich», memungkinkan dosis antigen. Teknik ini biasa digunakan dalam penelitian.

Menggunakan tes ELISA

Tes ELISA digunakan untuk:

  • Menemukan dan mengukur antibodi dalam serologi untuk diagnosis penyakit menular: virologi, parasitologi, bakteriologi, dll.;
  • Dosis protein pada konsentrasi rendah: dosis spesifik protein plasma tertentu (imunoglobulin E (IgE), feritin, hormon protein, dll.), penanda tumor, dll. ;
  • Dosis molekul kecil: hormon steroid, hormon tiroid, obat-obatan ...

Kasus paling umum: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, alergi, kehamilan

Tes ELISA digunakan khususnya untuk mendiagnosis banyak penyakit menular:

Penyakit menular seksual (PMS)

Termasuk hepatitis, sifilis, klamidia dan HIV. Direkomendasikan oleh otoritas kesehatan, ini adalah tes skrining AIDS utama: tes ini menunjukkan adanya antibodi anti-HIV dan antigen p24 enam minggu setelah infeksi.

Penyakit regional atau endemik

Demam kuning, penyakit virus Marburg (MVM), Ladengue, penyakit Lyme, Chikungunya, demam Lembah Rift, Ebola, demam Lassa, dll.

Covid-19

Untuk dilakukan lebih dari 2 sampai 3 minggu setelah timbulnya gejala, tes ELISA memungkinkan untuk mengidentifikasi, dalam waktu kurang dari satu jam, adanya antibodi anti-SARS-CoV-2.

Patogen virus yang menyebabkan infeksi prenatal

Toksoplasmosis, rubella, cytomegalovirus, herpes simpleks misalnya.

Kasus lainnya

Tetapi dia juga menemukan aplikasi dalam pendeteksian:

  • Kehamilan;
  • Penyakit autoimun;
  • Alergen makanan: penentuan kuantitatif total imunoglobulin E (IgE) membantu dalam penilaian dan pengobatan alergi;
  • Gangguan hormonal;
  • Penanda tumor;
  • virus tanaman;
  • Dan masih banyak lagi

Keandalan tes Covid-19

Sebagai bagian dari deteksi antibodi anti-SARS-CoV-2, studi percontohan yang dilakukan pada Agustus 2020 oleh Institut Pasteur, CNRS, Inserm, dan Universitas Paris mengonfirmasi keandalan tes ELISA: kedua tes ELISA diuji menggunakan seluruh protein N dari SARS-CoV-2 (ELISA N) atau domain ekstraseluler dari lonjakan virus (S) sebagai antigen target. Teknik ini akan memungkinkan untuk mengidentifikasi antibodi di lebih dari 90% kasus, dengan tingkat positif palsu yang sangat rendah sebesar 1%.

Harga dan penggantian biaya tes ELISA

Dilakukan di laboratorium analisis pada resep medis, tes Elisa biaya sekitar 10 euro dan diganti 100% oleh Asuransi Kesehatan.

Dilakukan di pusat informasi, skrining dan diagnostik gratis (CeGIDD), mereka dapat bebas untuk HIV dan SARS-CoV-2.

Tinggalkan Balasan